超分辨率显微镜系统【日本尼康、N-SIMS】
- 性能特点
- 技术参数
以两倍光学极限分辨率进行活细胞成像。
N-SIM S超分辨率显微镜采用独特的高速结构化照明系统，可实现高达15 fps的采集速度。这使其能以传统光学显微镜两倍的空间分辨率（XY高达115nm）捕捉快速的生物事件。结合N-SIM S和共聚焦显微镜，您可以灵活地选择共聚焦图像中的位点，并切换到超分辨率模式以展现样品细节。
主要特性
15 fps的高速超分辨率成像
尼康的新型高速结构化照明系统采用了一种新颖的图案调制技术，可以快速、精确地切换照明模式。N-SIM S实现了令人难以置信的采集速度（高达15 fps *），可实现活细胞和细胞内动态的超分辨率时间序列成像。
* 2D-SIM模式，512 x 512像素，2毫秒曝光时间
活细胞成像的分辨力是传统光学显微镜的两倍
N-SIM S采用尼康创新的结构化照明显微术方法。这项强大的技术与尼康著名的可以达到无与伦比的1.49数值孔径的物镜结合，N-SIM S几乎使传统光学显微镜的空间分辨力提高了一倍（达到约115 nm *），帮助用户观察到微小的胞内结构及其相互作用。
* 该值是在3D-SIM模式下用488nm激光激发的100nm小球的FWHM测量值。在TIRF-SIM模式中，使用用488nm激光激发的40nm小球实现86nm。
在照明模式之间自动切换
新开发的高速结构化照明技术不仅能够实现快速采集速率，还能实现照明模式之间的自动切换，以及针对不同波长和放大率的结构化照明模式的自动优化。这种扩展的自动化功能可实现快速双色TIRF-SIM成像以及不同SIM模式的多路复用。无论是单模还是多模态成像实验，N-SIM S都能提供易于使用的简化工作流程。
拍摄更大的视野
N-SIM S可以帮助用户拍摄到66微米见方的大视野的超分辨率图像。这个较大的成像区域使得从较大视野（例如神经元）受益的应用/样本的吞吐量非常高，从而减少了获取数据所需的时间和精力。
各种观察模式
TIRF-SIM / 2D-SIM模式
此模式可以高速捕捉超分辨率的2D图像，并具有令人难以置信的对比度。TIRF-SIM模式可实现全内反射荧光观察，其分辨力是传统TIRF显微镜的两倍，有助于更好地了解细胞表面的分子相互作用。
3D-SIM模式
3D-SIM模式生成三维结构化照明图案，使横向和轴向分辨力提高两倍。两种重建方法（“slice”和“stack”）可根据应用的要求（例如样品厚度，速度等）优化结果。Slice重建适用于在特定深度成像活细胞，因为它支持轴向超分辨率成像，具有300nm分辨率的光学切片。基于Gustafsson理论的stack重建适用于采集3D数据，因为它能以比slice重建更高的对比度成像更厚的样本。
同时双通道成像
通过使用可选的两个相机成像适配器*和两个sCMOS相机，用户可以同时进行双色成像。
* 安道尔科技有限公司
在多尺度实验的成像模式之间无缝切换
N-SIM S可以与共聚焦显微镜（如AX/AX R）同时组合。可以在低放大率/大视野共聚焦图像中指定样本中的期望位置，并且通过简单地切换成像方法以超分辨率拍摄。将共聚焦显微镜与超分辨率系统相结合可以提供获得超分辨率信息的更大上下文视图的方法。
超分辨率显微镜的物镜
硅油物镜
硅油物镜使用高粘度硅油作为浸没液体。其折射率接近活细胞的折射率。由于这种改进的折射率兼容性，当在样品中更深地进行超分辨率成像时，这些物镜可以提供改进的光子收集能力和分辨率。它们在宽波长范围内表现出优异的色差校正和高透射率。
浸液物镜
超分辨系列物镜使用波前像差测量技术进行对准和检查，以确保超分辨率成像所需的最低可能的非对称像差和卓越的光学性能。HP型号物镜提供超高功率激光激发耐久性和改进的轴向色差校正，无需在N-SIM S和N-STORM系统之间切换物镜。支持Ti2-E显微镜自动校正环的AC型物镜可以精确，轻松地调整校正环。
干镜
N-SIM S兼容干镜，无需切换镜头即可实现超分辨率成像和共聚焦成像。低放大倍率、大视野干镜即使在样品组织的周边也能实现高分辨力观察。
* 干镜支持2D-SIM和3D-SIM（slice重建）
| 横向分辨率（荧光小球的XY轴 FWHM） | 3D-SIM模式下为115 nm*1，TIRF-SIM模式下为86 nm*2 |
| 轴向分辨率（荧光小球的Z轴FWHM） | 在3D-SIM模式下为269 nm*1 |
| 图像采集时间 | 最高15 fps（TIRF-SIM / 2D-SIM，2毫秒曝光时间） |
| 重构图像大小 | 1024 x 1024像素，2048 x 2048像素 |
| 成像模式 | TIRF-SIM 2D-SIM 3D-SIM（重构方法：单张，序列） |
| 多色成像 | 最多6种颜色 |
| 同步 | 两种颜色 |
| 兼容的激光 | LU-NV系列激光单元 Standard: 405 nm, 488 nm, 561 nm, 640 nm Option: 445 nm LUD-HV系列激光单元 Standard: 405 nm, 488 nm, 561 nm, 640 nm Option: 445 nm, 515 nm Ziva Light Engine系列激光单元（2D/3D-SIM） 405 nm, 446 nm, 476 nm, 518 nm, 545 nm, 637 nm |
| 兼容的显微镜 | 电动倒置显微镜 ECLIPSE Ti2-E 完美聚焦系统 带编码器的电动XY平台 Piezo Z载物台 |
| 物镜 | CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil (NA1.35) CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC Oil（NA 1.49） CFI SR HP Apochromat TIRF 100XAC Oil（NA 1.49） CFI SR Plan Apochromat IR 60XC WI (NA 1.27) CFI SR Plan Apochromat IR 60XAC WI (NA 1.27) CFI Plan Apochromat Lambda 60XC（NA 0.95）* 3 CFI Plan Apochromat Lambda 40XC（NA 0.95）* 3 |
| 相机 | ORCA-Fusion BT sCMOS 相机 (Hamamatsu Photonics K.K.) |
| 软件 | NIS-Elements AR NIS-Elements C（用于共聚焦显微镜 AX/AX R) 两者都需要额外的软件模块NIS-A 6D和N-SIM分析 |
| 运行条件 | 20℃ 至 28 ℃ (± 1.5℃) |
*1这些值是使用由488nm激光激发的100nm直径荧光小球测量的。实际分辨率取决于激光波长和光学配置。
*2使用由488nm激光激发的40nm直径荧光小球测量该值。实际分辨率取决于激光波长和光学配置。
*3支持2D-SIM和3D-SIM（单张重构模式）。
